质粒构建的载体在基因工程中如何向下遗传,之后如何DNA检测,不是说提取宿主的基因组,是否包括质粒

光明右使 1年前他留下的回答 已收到3个回答

zhengkaiyan 网友

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如何遗传?重组质粒,即基因载体.是一个复制子,在细胞内可以自主复制,细胞分裂时,质粒随机分配进入子细胞,类似细胞质的母性遗传（如线粒体、叶绿体等）.
如何检测?质粒的检测因质粒性质不同而不同,一般人工质粒有抗性基因,可以通过抗性筛选而大致判断.最经典的质粒确认是质粒DNA提取（不含有宿主DNA的）之后进行电泳确认其大小（3条带）.还可以通过质粒上特殊序列的PCR扩增而确认.你说的提取宿主基因组一般方法所得DNA均包括质粒DNA在内可用于PCR扩增模板.

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只为ysy093 网友

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重组的克隆载体或表达载体转化到感受态细胞中后能自主复制。利用菌落PCR可以扩增出与目的片段相当的条带，说明目的片段已经成功插入载体，也可进行测序进一步验证。

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Eric_xiao 网友

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我想你说构建的载体应该是表达载体：
有两种表达载体：包括原核表达载体和真核表达载体，分子检测的时候不同的表达载体检测方法也不一样
原核表达载体通过转化进入到宿主菌中，菌液PCR鉴定，阳性克隆提质粒酶切，切下目的条带，说明成功转入目的载体；
真核表达载体先转入农杆菌中，菌液PCR检测有目的条带，证明表达载体成功转入农杆菌中。下一步就是将含有表达载体的农...

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