370626027 网友
该名网友总共回答了23个问题，此问答他的回答如下：采纳率：87%
溶解曲线分析可以用来确定不同的反应产物,包括非特异性产物.扩增反应完成后,通过逐渐增加温度同时监测每一步的荧光信号来产生溶解曲线,随着反应中双链DNA变性,荧光染料又回复到游离状态导致荧光信号降低,用荧光信号改变的负的一次导数与温度作图,在扩增产物的溶解温度上有一特征峰（Tm,DNA双链解链50％的温度）,用这个特征峰就可以将特异产物与其它产物如引物二聚体区分开,因为它们在不同的温度溶解.这个一般是用SYBY Green作为荧光染料的时候需要做的工作!因为SYBY Green染料是非特异的染料,只要有扩增,染料就可以镶嵌在双链中发出荧光.我们做溶解曲线是为了观察我们扩增发出荧光的片段是不是我们需要的产物.如果溶解曲线做出来只有单峰,且出锋位置是你的退火温度,那么这个是你的产物发出的荧光,实验结果有效.如果出现多锋或退火温度不对,那么这个实验结果是不可信的!你需要再次调整!………………1年前他留下的回答
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