英语翻译Northern blot assays.Ten micrograms of total RNA was sep

英语翻译
Northern blot assays.Ten micrograms of total RNA was separated on denaturing
gels,transferred to nylon membranes,and baked for 2 h at 80°C,as
suggested by the manufacturer (Ambion).32P-labeled antisense RNAs were used
as probes.Antisense RNA probes were obtained by in vitro transcription (Ambion)
of purified plasmid DNA (Qiagen) containing the selected genes.Membranes
were prehybridized in Ultrahyb solution (Ambion) for 1 h at 64°C,
hybridized overnight with 5 *10的6次方 cpm of labeled probe,and washed four times
in 0.1* SSC–0.1% SDS (30 min each time) at 68°C.
不会的专业词可以不翻译 zlj_22 1年前他留下的回答 已收到2个回答

lauraczq 网友

该名网友总共回答了22个问题，此问答他的回答如下：采纳率：95.5%

病毒,巨噬细胞的感染,基因标记及杂交.asfv pr4孤立于蜱所得的克鲁格国家公园,是南非共和国于1996年(南非 pretoriuskop/96/4 )已在有限的机票,在猪巨噬细胞培养物( 1 ) .pr4缺失pr4△35强,缺乏六个mgf360两mgf530基因,构建如前所述( 54 ) .巨噬细胞的制备如前所述( 19 ) .文化也受到感染,与pr4和pr4△35病毒在莫伊10 .病毒枯竭,pr4△35 -病毒培养上清准备,以确定是否感染病毒需诱导巨噬细胞的转录响应( moi 为0.0004 ) .病毒被拆除,经过滤通过一个0.4μm-孔径大小过滤,然后按0.1 -μm-孔径低proteinbinding滤波器( millipore ) ( prefiltration滴度1.5 * 10的8次方; postfiltration滴度2.9 *10的第2次方) .在3日和6裴氏,细胞RNA与trizol ( invitrogen ) ,其次是--LiCl沉淀,大约10μg总RNA标记cy3和cy5的aminoallyl的cDNA标记试剂盒( ambion ) .幻灯片prehybridized为30分钟,2 * ssc ( 1 *食糖是0.15米盐加上0.015米的柠檬酸钠) 0.1 %十二烷基硫酸钠( SDS ) -1 %牛血清白蛋白在55 ° C ,llowed由两个5分钟洗澡室温( RT )和2 * SSC和0.2 *食糖.cdnas were hybridized to the cDNA阵列为72小时,在45 ° C的杂交cmt庭(康宁公司)与40% formamide - 4 * ssc - 1% sds - 2 * denhardt解- 80 ng聚(一) ( Pharmacia公司) ,每μl( 26岁,43 )及洗先后在0.2% sds在55 ° C ( 15分钟) ,2 * ssc常温( 15分钟) ,d 0.2 * ssc常温( 15分钟) .

1年前他留下的回答

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973803ming 网友

该名网友总共回答了3个问题，此问答他的回答如下：

北方印迹. 10微克,总RNA分离denaturing gels ,转移到尼龙膜, 烧2 h at 80 ° C ,所以建议由本制造商( ambion ) . 32P标记反义RNA为探针. 反义核酸探针,获得了体外转录( ambion )纯化的质粒(盒) ,其中载有某些基因. 膜prehybridized在ultrahyb解( ambion ) 1小时后,在64 ° C时 杂交过夜与5*10的6次...

1年前他留下的回答

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