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常规多肽的固相合成方法

网站编辑:上海建站网 发布时间:2022-04-15  点击数:
导读:操作步骤/方法1树脂溶胀2称量取代度为1.0mmol/g的0.6gCTCResin,将树脂放入反应管中,加DCM(大致15ml/g),振荡30min。假如选用的时其它树脂,通常会提前将第一个氨基酸与树脂连接好,如Fmoc-Leu-WangResin,溶胀后直接进行第三部脱保护操作。3二缩合第一个氨基酸4通过沙芯抽滤掉溶剂,加入3倍摩尔过量的Fmoc-Leu-OH,加入少量DMF溶解,再加入6倍摩尔...
常规多肽的固相合成方法

操作步骤/方法

1 树脂溶胀 2 称量取代度为1.0mmol/g的0.6gCTCResin,将树脂放入反应管中,加DCM(大致15ml/g),振荡30min。假如选用的时其它树脂,通常会提前将第一个氨基酸与树脂连接好,如Fmoc-Leu-WangResin,溶胀后直接进行第三部脱保护操作。 3 二缩合第一个氨基酸 4 通过沙芯抽滤掉溶剂,加入3倍摩尔过量的Fmoc-Leu-OH,加入少量DMF溶解,再加入6倍摩尔量的DIPEA,最后加入2.85倍摩尔量缩合试剂HBTU,鼓氮气0.5h。使用DMF洗涤3-4次,去少量树脂(大约20多颗树脂即可)进行茚三酮检测,为无色。 5 三脱保护 6 加15ml20%哌啶/DMF溶液(15ml/g),5min,去掉再加15ml20%哌啶DMF溶液(15ml/g),15min。使用DMF洗涤5次,去少量树脂(大约20多颗树脂即可)进行茚三酮检测,为蓝色(或其他颜色)。 7 四以此类推重复第二和第三步骤,最后用甲醇洗树脂3次,并抽干。最终得到流沙状的树脂肽,例如:H2N-Gly-Arg(Pbf)-His(Trt)-Ile-Leu-CTCResin。 8 五切割 9 具体操作见多肽切割一文,已有很详细介绍。 10 六补充: 11 一般采用茚三酮检测,加热温度为110℃左右,加热时间为3min。其溶液配比也有很多种,实验者可以多尝试一下。 END

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